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    土霉素和博落回提取物促進肉雞生長效應是基于它們的抗炎特性

    文章來源:仹犇泰 作者: 更新時間:2022-10-21

      Alireza Khadem, Laura Soler, Nadia Everaert and Theo A. Niewold*gbi中國飼料行業信息網-立足飼料,服務畜牧

      比利時魯汶大學生物科學工程學院生物系統系牲畜營養質量系,阿倫貝格城堡公園30號,B-3001 比利時赫弗利gbi中國飼料行業信息網-立足飼料,服務畜牧

      基于Phytobiotics德國仹犇泰有限公司的科研基金的支持gbi中國飼料行業信息網-立足飼料,服務畜牧

      摘要gbi中國飼料行業信息網-立足飼料,服務畜牧

      抗生素促生長劑(AGP)的非抗生素替代品在抗炎理論預測,可以通過簡單的體外試驗選擇合適的體抗替代品。在體外,已知的AGP土霉素(OTC)和植物源的博落回提取物(MCE)都具有抗炎作用,半最大抑制濃度分別為88和132mg / L。在體內,雞在飲用水中接受三種不同濃度的博落回提取物MCE,在飼料中接受土霉素OTC和對照。在第14、21和35天測定體重(BW)、采食量(FI)和增重:采食(增重:采食(G:F)比率。第35天,確定了身體成分。在第21天和第35天測量血漿a1-酸糖蛋白(a1-AG)濃度,并在第35天測定幾種空腸炎癥基因的表達。與對照組相比,土霉素OTC喂養的雞在所有時間點都顯示出顯著更高的體重(BW),FI和增重:采食(增重:采食(G:F))比率。博落回提取物MCE在第21天和第35天對體重(BW)有顯著的線性影響,增重:采食(G:F)比率僅在整個期間得到改善,而采食量(采食量(FI))則沒有不同。只有博落回提取物MCE而不是土霉素OTC降低了腹部脂肪的百分比。血漿a1-AG濃度從第21天增加到第35天,治療組的值較低。土霉素OTC和博落回提取物MCE均顯著降低了誘導性NO氮氧化合酶的空腸粘膜表達。對于測量的大多數參數,對博落回提取物MCE治療有明顯的線性劑量反應。綜上所述,研究結果與生產動物生長促進的抗炎理論一致。gbi中國飼料行業信息網-立足飼料,服務畜牧

      關鍵詞: 抗生素促生長劑: 抗炎特性: 血根堿: 土霉素gbi中國飼料行業信息網-立足飼料,服務畜牧

      介紹gbi中國飼料行業信息網-立足飼料,服務畜牧

      早些時候,抗生素促生長劑(AGP)對生產動物的有益作用歸因于其抗生素特性[1]。由于各種原因,抗生素不能長期用于亞治療濃度如抗生素促生長劑AGP時,抗生素活性和抗生素抑菌廣譜性之間沒有必然關系,此外,抗生素在抑菌作用中具有普遍相似的特征。因此,有人提出AGP如土霉素(OTC)通過直接抑制(腸道)炎癥反應起作用[2]。另一個論點是,AGP似乎在存在廣泛的抗生素耐藥性的情況下仍然有效[3]。這也解釋了為什么非抗生素抗炎化合物如乙酰水楊酸被描述為具有類似的作用(例如,Xu[4])。近年來,一些研究支持了AGP直接抑制豬和家禽炎癥的概念[5-8]。因此,AGP 的替代藥物應為抗炎藥,而不是抗生素。在擬議的抗生素抗炎替代品中,有仹犇泰生物的植物源抗炎藥物,如博落回提取物(MCE)。它含有異喹啉生物堿,如血根堿和白屈菜紅堿,具有抗炎活性[9]。本研究的目的是在炎癥的體外標準模型中確認博落回提取物MCE的抗炎特性,并將其與使用土霉素OTC作為陽性對照的溴化器中的體內生長促進相關聯。實驗農場的條件通常不太理想,無法檢測到生長促進劑的任何影響,多數情況是因為沒有任何應激挑戰。為了提供應激挑戰,在本實驗中,在所有實驗日糧中都沒有使用球孢子菌素(以此作為被動細菌應激)。gbi中國飼料行業信息網-立足飼料,服務畜牧

      材料與方法gbi中國飼料行業信息網-立足飼料,服務畜牧

      博落回提取物體外抗炎活性的評價gbi中國飼料行業信息網-立足飼料,服務畜牧

      博落回提取物MCE是Sangrovit仹犇威WS水溶性添加產品,源自仹犇泰德國有限公司Sangrovit 仹犇威WS水溶性已在歐盟注冊為所有動物物種的補充飼料,并已進入美國的注冊程序。在歐盟注冊試驗中,Sangrovit仹犇威水溶性,其內含物水平高達1000 mg / L時也不會造成肉雞死亡率增加(數據未顯示)。體外使用的博落回提取物MCE批次含有14229mg/kg的血根堿和4400mg/kg的白屈菜紅堿,這是使用Kosina的方法確定的[10]。將博落回提取物MCE的抗炎作用與超純氧四環素二水合物的抗炎作用進行比較(參考文獻No.O4636;西格瑪-奧爾德里奇)。使用RAW 264.7測定法測試了博落回提取物MCE和土霉素OTC的抗炎活性,基本上如Wu所述[11]。簡言之,單核細胞系RAW 264.7(美國型培養物收集;ATCC)在Dulbecco的改性鷹培養基的細胞培養瓶中生長,該培養基含有4·5克/升葡萄糖,L-谷氨酰胺和碳酸氫鈉,不含丙酮酸鹽,與10%的胎牛血清(Biochrom AG,國際醫藥)融合,然后刮掉,重懸于相同的培養基中,但沒有酚紅,并接種到細胞密度為1英鎊106個細胞/毫升的96孔板(100毫升/孔)中(Nuncsterile; Sigma-Aldrich西格瑪公司)。將細胞在378C下孵育24小時。然后,加入50ml /孔連續稀釋的土霉素OTC和含血根堿的提取物(MCE)并在378C下孵育4小時。隨后,加入50ml含有脂多糖(LPS; 50ng LPS / ml)的培養基或50 ml培養基,得到終濃度為12·5 ng LPS / ml,并在378C下孵育24 h。使用的LPS來自大腸桿菌055:B5(西格瑪 - 奧爾德里奇)。然后,取100ml培養基并移液到另一個96孔板(Nunc-無菌; 西格瑪-奧爾德里奇)。使用Griss試劑使用NaNO2的連續稀釋作為標準品來測量NO的產生。示例一式兩份運行。在含有105個細胞/孔的96孔板中滴定制劑。炎癥反應是通過產生NO來測量的。半最大值抑制濃度(IC50)使用乙狀體劑量響應(可變斜率)方法進行鈣化,使用Windows的圖形Pad棱鏡5(GraphPad Software, Inc軟件公司)。gbi中國飼料行業信息網-立足飼料,服務畜牧

      生長性能提升和抗炎活性的評估gbi中國飼料行業信息網-立足飼料,服務畜牧

      實驗動物方案得到了魯汶大學當地動物實驗倫理委員會的批準。該實驗是完全隨機設計的土霉素OTC和博落回提取物MCE在三種不同濃度下的處理。 在體內實驗中,鹽酸土霉素(112參考編號:O5875, 95 % 高效液相色譜, 結晶;西格瑪-奧爾德里奇)被用于商業用途。使用Kosina的方法[10]建立的體內博落回提取物MCE批次含有11 078mg/kg血根堿和4320mg/kg白屈紅堿,這意味著它含有約1.5%的活性苯丙菲啶化合物。在實驗過程中確定了生長參數,并在研究結束時阻止了身體成分。通過血漿中急性期蛋白a1-酸糖蛋白(a1-AG)的水平定期測量日糧治療的抗炎作用,并且通過IL-1b和IL-10的空腸表達以及誘導NO合成酶(iNOS)的表達來確定局部抗炎作用。共有900只雄性肉雞(Ross 308),年齡1 d歲,平均體重相似(體重(BW); 46·5(SEM 0·01)g),接受新城疫疫苗,從商業孵化場(比利時梅爾克斯普拉斯的Belgabroed孵化場)獲得。雞被安置在0·8平方米的平養圍欄里,并在魯汶大學動物技術中心的木屑墊料上飼養。在雞被接受后處于35.8C的初始溫度條件下用加熱器控制溫度,然后每天降低0·58C,直到出生后第4周達到22.8C。雞暴露于以下照明時間表:第1天至第4天,23·30小時;第4天到第35天,18小時。實驗是用六十個圍欄進行的,每支筆有十五只肉雞,每次處理有十二支豬。對于每支豬圈,在第1天隨機選擇一只肉雞(哨兵),并在第21天和第35天用顏色標記血液采樣,并在第35天測定身體成分和空腸基因表達。向1至14 d和15至35 d年齡的肉雞提供商業前期飼料和后期飼料日糧(表1);兩種日糧都沒有球孢子菌制劑。在整個實驗過程中提供自由飼料采食和水。第14天,針對古姆博羅病和新城疫的進行飲用水疫苗。gbi中國飼料行業信息網-立足飼料,服務畜牧

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      從第1天開始,給雞喂食以下五種處理:三種不同濃度的博落回提取物MCE(25,50和100mg/升)在飲用水中;非處方藥(200mg/公斤)在飼料中;控件。土霉素OTC的攝入量是根據飼料的消耗量計算的。由于溢出量過高,無法根據測量的用水量計算出博落回提取物MCE的估計攝入量。因此,計算基于采水量是采食量(FI)的兩倍的假設[12,13]。gbi中國飼料行業信息網-立足飼料,服務畜牧

      生長參數和身體成分分析gbi中國飼料行業信息網-立足飼料,服務畜牧

      在第14、21和35天確定了體重(BW)、采食量(FI)和增益:進給量(增重:采食(G:F))比。采食量(FI)對死亡率進行了校正,這是每天記錄的。在實驗結束時,記錄了六十只被安樂死進行采樣,標記肉雞的腸道,腹部脂肪,肝臟和身體其余器官的重量。gbi中國飼料行業信息網-立足飼料,服務畜牧

      血漿a1-酸糖蛋白測量gbi中國飼料行業信息網-立足飼料,服務畜牧

      在第21天和第35天從哨兵的翼靜脈中取出肝素血樣,并通過在750g下離心15分鐘分離血漿,并在-22C下儲存直至進一步使用。使用商業放射免疫擴散試劑盒研究a1-AG的血漿水平。使用雞a1-AG板,在瓊脂糖凝膠中加入特定的兔源抗雞a1-AG血清(Saikin Kagaku西金加賀國際有限公司),如Takahashi所述(14)。制作0,125,250,500和1000mg / ml a1-AG的標準曲線,向孔中加入5ml血漿或標準品,并將板在25C的水分室中孵育過夜。根據樣品中沉淀素環的直徑和標準曲線計算每個測試樣品的a1-AG濃度。gbi中國飼料行業信息網-立足飼料,服務畜牧

      炎癥細胞因子IL-1b和IL-10的腸道表達,以及可誘導NO氧化氮合酶的分析gbi中國飼料行業信息網-立足飼料,服務畜牧

      在第35天的實驗結束時,從60只標記的小雞中取出10厘米的中空腸部分。用冰冷的PBS洗滌去除食糜,并用載玻片刮掉粘膜。將刮屑在液體N2中速凍,然后保持在-80C直至分析。使用TRIzol試劑盒(Invitrogen公司)分離總RNA,并通過RNeasy小柱(RNeasy迷你試劑盒;Qiagen),根據制造商的說明方法。通過使用光譜光度計(NanoDrop ND-1000;Qiagen)。使用隨機引物(Qiagen),dNTP混合物(VWR)和RT(AMV-RT酶;Promega)與緩沖液和重組RNASIN核糖核糖核酸酶抑制(Promega)一起使用標準方案進行轉錄(15)。所得cDNA在2208C下儲存,直到定量實時熒光定量PCR分析。gbi中國飼料行業信息網-立足飼料,服務畜牧

      引物(表5)采用軟件DNAman 5.0(BioSoft)設計,設計用于跨越外顯子 - 外顯子連接,并從英特維森獲得。對于數據歸一化,五個基因被評估為管家基因:泛素(UB); b-肌動蛋白;甘油醛-3-磷酸脫氫酶;b2-微球蛋白;琥珀酸脫氫酶復合物,亞基(SDHA)。為了確定最合適的管家基因,使用相對標準曲線作為定量RT-PCR方法測量潛在參考基因的相對mRNA豐度[16]。來自這五個管家基因的相對mRNA值用特定軟件(geNorm,版本3.4)進行分析。UB和ACTB顯示出最低的平均M值,并且被確定為兩個最穩定的參考基因,如Vandesompele[17]所述,并用于使mRNA測量正?;?。gbi中國飼料行業信息網-立足飼料,服務畜牧

      對 iNOS、IL-1b、IL-10、ACTB 和 UB 進行定量實時熒光定量 PCR。建立連續稀釋的cDNA的校準曲線,對各基因表達進行定量分析,使用 ABI 棱鏡 7700 序列(應用生物系統)檢測系統[18]。 每次PCR包括10ng的tem-板cDNA(單樣或全樣),引物,SYBR綠色PCR預混液(應用生物系統)和無RNase水(Qiagen),最大20毫升。每次測定都包括一式三份的cDNA樣品,以及空白(缺乏cDNA的反應)和校準曲線。擴增程序包括在95C下初始變性10分鐘,然后在95C下進行40個循環變性15秒和60C進行1分鐘,以及在95C下解離曲線15秒,60C下1分鐘和95C下15秒。在擴增結束時生成熔解曲線,以驗證單個產物的存在。使用合并RNA的連續稀釋法生成包含兩個參考基因的標準曲線。PCR效率為90 – 110 %(3·2,斜率3·8),相關系數為>0.98。gbi中國飼料行業信息網-立足飼料,服務畜牧

      統計分析gbi中國飼料行業信息網-立足飼料,服務畜牧

      使用適用于 Windows 的 SAS 執行統計分析(版本 9·4;SAS公司研究所)。筆被認為是測量體重(BW),采食量(FI)和增重:采食(G:F)比率的實驗單位。對于a1-AG,身體成分和基因表達測量(在哨兵中進行),個體雞被認為是實驗單位。檢查所有數據的異常值和殘差的正態性。使用柯爾莫哥洛夫-斯米爾諾夫檢驗評估樣本分布的正態性,并對未正態分布的數據進行對數變換。使用一般線性模型分析腸道重量,腹部脂肪和肝臟以及基因表達。此外,使用線性,二次和三次多項式對比指定劑量 - 響應建模的對比度,校正博落回提取物MCE的不等間距(0,25,50和100 mg / L),并且第四個對比度用于比較土霉素OTC與對照。將不同時間點記錄的a1-AG、體重(BW)、采食量(FI)和增重:采食(G:F)比率的變換數據置于線性混合模型(19)中,以處理、時間(重復選項)和處理£時間相互作用作為固定效應。線性混合模型如下: Y ij ¼ m þ Ai þ Bj þ ABij þ eij ;gbi中國飼料行業信息網-立足飼料,服務畜牧

      其中 m 是總體均值; A是治療的效果;B 是其中 m 是總體均值; A是治療的效果;B是時間的固定效應; ABij是每份零食的時間相互作用 eij 是隨機殘差誤差。此外,博落回提取物MCE的劑量反應(0,25,50和100 mg / L)用三個多項式對比(線性,二次和立方)建模,校正不相等的間距,第四個對比用于比較不同時間點的土霉素OTC與對照。未發現立方體關系。gbi中國飼料行業信息網-立足飼料,服務畜牧

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      結果gbi中國飼料行業信息網-立足飼料,服務畜牧

      抗炎活性的體外評估gbi中國飼料行業信息網-立足飼料,服務畜牧

      OTC抑制LPS誘導的NO產生,此時IC50值為88(95%CI 88,99)mg / L,而MCE在IC50值為132(95%CI 94,170)mg / l時抑制。抑制NO產生不是細胞死亡的結果,因為早期使用四唑鹽方法建立,細胞活力在任何處理中均不受影響(數據未顯示)。gbi中國飼料行業信息網-立足飼料,服務畜牧

      生長促進和抗炎活性的體內評估gbi中國飼料行業信息網-立足飼料,服務畜牧

      本研究中,沒有發現顯著的立方關系(數據未顯示)。五種日糧處理對體重(BW),采食量(FI)和增重:采食(G:F)比率的影響總結在表2中。土霉素OTC非顯著提高肉雞在對照下的所有日齡的體重(BW)(P,0·01)。博落回提取物MCE在21和35 d(分別為P1/4 0·012和P1/4 0·0002)下以線性方式顯著增強了體重(BW)。關于0 – 3和0 – 5周的平均飼料消耗率,土霉素OTC喂養的雞消耗的飼料量明顯多于對照組,而博落回提取物MCE對采食量(FI)沒有影響。005)在5周的時間內。在時間與處理之間,體重(BW)、采食量(FI)和增重:采食(G:F)比值的相互作用均有統計學意義(P,0·01)。死亡率與治療不顯著(P1/4 0·08)相關,但主要與球蟲病的典型癥狀相關。博落回提取物MCE(25、50和100mg/升)和非處方藥(87、155、310和321mg/kg體重)的土霉素OTC和博落回提取物MCE的攝入量分別根據飼料和水的消耗量計算,超過7周。gbi中國飼料行業信息網-立足飼料,服務畜牧

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      為了確定其他參數,使用了六十只標記的雞。對于體重(BW),后期的雞的體重(BW)與處理組沒有顯著差異(數據未顯示)。gbi中國飼料行業信息網-立足飼料,服務畜牧

      與對照組相比,沒有器官的肝臟,腸道和身體的重量與日糧治療沒有差異。在用土霉素OTC喂養的雞中,腹部脂肪的重量沒有發現差異,而在博落回提取物MCE濃度增加的喂養中觀察到腹部脂肪的顯著(P1/4 0·011)線性較低百分比(表3)。在處理之間沒有發現a1-AG的血漿濃度有顯著差異,盡管數值與對照相比較低(表4)。使用定量RT-PCR建立了五種可能的參考基因和三個靶基因的表達(表5)。gbi中國飼料行業信息網-立足飼料,服務畜牧

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      5個參比基因的M值為1·13,B2M為0·84,SDHA為0·76,ACTB和UB均為0·72。后兩個基因用于靶基因表達的歸一化,因為它們具有最低的平均M(穩定性)值。炎癥細胞因子IL-10的表達不受日糧治療的影響。對于IL-1b,觀察到博落回提取物MCE的二次效應(P1/4 0·026)。對于iNOS,在用土霉素OTC處理的小雞(P1/4 0·003)中觀察到顯著降低的iNOS表達,并且在博落回提取物MCE處理的雞中觀察到空腸表達顯著線性下降(P1/4 0·003)(表6)。gbi中國飼料行業信息網-立足飼料,服務畜牧

      討論gbi中國飼料行業信息網-立足飼料,服務畜牧

      飼料或疾病引起的炎癥與生長和健康呈負相關[20]。沒有任何炎癥的肉雞可以達到100%的遺傳生長潛力。炎癥導致生長減少(通過無癥狀和肌肉分解代謝),其大小取決于應激刺激的大小。這就解釋了為什么AGP的抗炎特性在較大應激挑戰中更有效。有效的生長促進劑必須是炎癥反應的抑制劑,包括代謝性炎癥[2,21]。已建立的生長促進劑如四環素具有體內和體外抗炎促進作用[22-28]。事實上,四環素類藥物是非常有效的NO生物合成抑制劑,對于RAW細胞中的多西環素[24],IC50值為72mg / L,這與本研究中發現的土霉素OTC的IC50值為88mg / L非常相似。這意味著四環素類藥物比已實證的抗炎藥(如阿司匹林和吲哚美辛)更有效,IC50值分別為540和720mg / L[29]。gbi中國飼料行業信息網-立足飼料,服務畜牧

      在肉雞中,50 mg土霉素OTC/kg飼料對巨噬細胞功能有免疫抑制作用[30]。最近,在小鼠模型中顯示,金霉素對腸道炎癥細胞因子具有下調作用,同時減少體重減輕[31]。一些體外和體內研究已經確定了血根堿和博落回提取物MCE的抗炎作用[9,32-34]。這些生物堿對大鼠誘導的爪水腫表現出抗炎作用[32]。Chaturvedi(34)報道,血根堿是人骨髓ML-1細胞中NF-kB活化的抑制劑。這為血根堿發揮其抗炎作用的機制提供了證據。體外使用的提取物含有1.8%的活性苯丙菲啶化合物,這意味著后者的IC50值約為3 mg/l,這與人多形核細胞純桑桂柚子的IC50值一致[33]。在這里,我們表明博落回提取物MCE具有與土霉素OTC非常相似的體外抗炎活性。gbi中國飼料行業信息網-立足飼料,服務畜牧

      根據這一發現,預計博落回提取物MCE在體內的行為也類似。 體內活性的先決條件是近端腸道攝取量應較低,以維持遠端小腸的有效濃度。例如,某些多酚就是這種情況,這些多酚已被提議作為人類炎癥性腸病的有用添加劑[35]。相比之下,SCFA如丁酸鹽幾乎完全被胃和近端小腸吸收,精油也是如此[36],這可以解釋發表的經常相互矛盾的結果[37]。為了補償吸收,應增加飼料中的劑量或需要抗胃蓋敷,這兩者都是昂貴的。有限的可用數據(來自大鼠)顯示,58%的土霉素OTC[38]和1-2%的血根堿[10]在胃中被吸收。這仍然使相當比例的博落回提取物MCE和土霉素OTC到達小腸,并發揮抗炎活性。gbi中國飼料行業信息網-立足飼料,服務畜牧

      基于體外抗炎特性,預計土霉素OTC和博落回提取物MCE都將改善體重(BW),采食量(FI)和增重:采食(G:F)比率,減少腹部脂肪并降低血漿和腸道中的炎癥參數。與對照組(博落回提取物MCE 0 mg/l)相比,200 mg 土霉素OTC/kg 的飼料補充使 體重(BW)、采食量(FI) 和 增重:采食(G:F) 比率顯著提高。后一項發現與Dong[39]使用金霉素的報告一致,只是后者發現對增重:采食(G:F)比率的影響僅限于前2周。炎癥通過降低食欲和增強肌肉分解代謝來抑制生長,并且在最近的一項研究中,據估計,食欲下降是炎癥引起的雞生長抑制(Klasing,個人交流)的最大癥狀(70%)。土霉素OTC組中采食量(FI)的增加表明,它確實在體內也作為抗炎劑具有活性,因為食欲增加不能輕易地從AGP上的抗菌理論中解釋。博落回提取物MCE主要對生物量和增重:采食(G:F)比等績效指標有顯著影響。與其他參數一樣,對性能的影響大多以線性方式顯著,盡管僅在前14 d中發現增重:采食(G:F)比值和IL-1b的空腸表達具有適度的二次效應,兩者均沒有并發線性效應。由于這種效應的生物學意義尚不清楚,因此不再進一步討論。此外,沒有發現立方關系。gbi中國飼料行業信息網-立足飼料,服務畜牧

      與土霉素OTC喂養的雞類似,與對照組相比,在第21天和第35天,用博落回提取物MCE喂養的雞的體重(BW)呈顯著線性增加。與 土霉素OTC 處理的雞相比,用 博落回提取物MCE 處理的雞的 采食量(FI) 沒有差異,但在 5 周內,其 增重:采食(G:F) 比值有很強的線性影響。目前關于生物量和增重:采食(G:F)比率的結果與Vieira報告的[40]在肉雞中的發現相似。關于身體成分,肝臟和腸道重量沒有受到與對照相稱的日糧治療的顯著影響。這些結果與Hernandez[41]報告的結果一致,他們沒有發現對照治療與含有抗生素或植物提取物混合物的日糧之間有任何差異。在本研究中,我們發現與對照組相比,博落回提取物MCE對腹部脂肪百分比有顯著的線性影響。較低的腹部脂肪百分比與抑制炎癥反應一致,其中皮質類固醇控制脂肪沉積物的重新分配,并且研究[42,43]表明,肉雞的腹部脂肪因兩種最高(日糧)皮質酮濃度(20和40mg / kg)而增加6倍。gbi中國飼料行業信息網-立足飼料,服務畜牧

      相反,抗炎化合物有望降低腹部脂肪的百分比,這適用于博落回提取物MCE,但不適用于土霉素OTC。在這里,我們發現血漿急性期蛋白水平沒有顯著降低與控制;然而,在治療組和對照組中,它們在數字上較低,這表明具有抗炎作用。上述大多數結果表明,土霉素OTC和博落回提取物MCE都通過抗炎機制起作用。雖然兩者相似,但也存在一些差異和看似不一致的地方。gbi中國飼料行業信息網-立足飼料,服務畜牧

      對于博落回提取物MCE,結果與我們預期的抗炎化合物(采食量(FI)除外)的結果一致,而不是土霉素OTC。這表明,博落回提取物MCE缺乏土霉素OTC顯然對食欲的預期影響。用博落回提取物MCE治療的雞中增重:采食(G:F)比率的改善可以解釋為肌肉損失減少的連續序列,這在用土霉素OTC喂養的雞中不存在。后者也沒有顯示出對腹部脂肪百分比的影響,而博落回提取物MCE則有。場外交易和博落回提取物MCE之間的區別不容易解釋。它們可能是由于迄今為止未知的副作用,或者由于它們起作用的細胞水平的差異。這里的一個問題是,盡管許多抗生素的抗炎作用已經明確建立,但對確切的機制一無所知。后者也適用于眾所周知的(非抗生素)抗炎化合物乙酰水楊酸。乙酰水楊酸是在大多數細胞類型中表達的環加氧酶-1(COX1)的抑制劑,但在炎癥刺激后不受調節,而不是COX2[44]。利用小鼠巨噬細胞系RAW 264.7和LPS刺激,已經證明乙酰水楊酸的抗炎作用不能通過抑制COX1-介導的PG合成來完全解釋,但已經發現NF-kB途徑參與這種抑制[45]。在大鼠腸細胞中,COX1也是組成性的,并且抑制LPS誘導的COX2表達由乙酰水楊酸類似物乙酰水楊酸[46]調節。有趣的是,乙酰水楊酸影響體重(BW)和采食量(FI),但不影響增重:采食(G:F)比[4],類似于土霉素OTC,這表明一個共同的目標。它還表明,博落回提取物MCE部分地在不同級別運作。眾所周知,血根堿抑制NF-kB的表達,COX2表達由NF-kB誘導,以及iNOS的誘導,這導致NO的產生,如本研究的體外實驗中觀察到的那樣,這兩種化合物都可以抑制NO。此外,據報道,血根堿可抑制由NF-kB介導的人腹膜巨噬細胞中絲裂原活化蛋白激酶的活化,并調節NO的產生[47]。gbi中國飼料行業信息網-立足飼料,服務畜牧

      然而,NF-kB誘導與COX2和NO產生之間涉及許多步驟,并且對這些過程中涉及的許多信號通路知之甚少[48]。此外,抗炎化合物并不總是對炎癥參數具有預期的體內作用,例如在人類癌癥惡病質中已經證明的那樣[49]。同樣有可能的是,所涉機制中至少有一部分主要在地方一級。因此,研究了土霉素OTC和博落回提取物MCE對所選小腸基因表達水平的影響。預計土霉素OTC和博落回提取物MCE將下調促炎細胞因子IL-1b和iNOS,并上調抗炎細胞因子IL-10。治療對兩種細胞因子沒有受到顯著影響,盡管這些細胞因子的水平在數值上低于對照組。這兩種細胞因子只是具有重疊功能的數十種不同細胞因子中的兩種,這些細胞因子在(腸道)炎癥中非常復雜和錯綜復雜的細胞因子網絡中參與調控,因此很難僅從水平中得出結論[49]。無論如何,土霉素OTC和博落回提取物MCE確實下調了iNOS的表達,表明喂養這兩種化合物對粘膜水平具有明確的抗炎作用。此外,對于所有測量的平均值,對博落回提取物MCE有明顯的劑量反應,這對第21天和第35天的體重(BW),35 d以上的增重:采食(G:F)比值以及第35天的腹部脂肪和空腸iNOS表達百分比具有顯著的線性影響。這種劑量反應效應非常重要,因為它使得觀察到的影響不太可能僅僅是偶然的,但它指向了一種真實的生物現象。與哺乳動物物種相比,對家禽胃腸道炎癥反應的了解要少得多。然而,現有研究表明,在雞小腸中存在和調節免疫轉錄本和蛋白質方面,與哺乳動物普遍相似[50-52]。例如,膳食b-葡聚糖確實調節了雞中空腸iNOS的表達,就像在哺乳動物中一樣[52]。根據后一項發現,可以預期博落回提取物MCE對豬等其他生產物種產生類似的影響,但目前還沒有這樣的出版物。 在人類中,植物性抗炎化合物(如博落回提取物MCE)可能有助于治療疾病,如炎癥性腸病。gbi中國飼料行業信息網-立足飼料,服務畜牧

      關于生產性動物的生長促進,可以得出結論,目前關于博落回提取物MCE和土霉素OTC的數據在很大程度上與抗炎理論一致,盡管所涉及的確切途徑和機制仍有待闡明。因此,可以根據未來研究的進一步發現成功確立AGP的有效替代方案。gbi中國飼料行業信息網-立足飼料,服務畜牧

      特別感謝gbi中國飼料行業信息網-立足飼料,服務畜牧

      本研究得到了Phytobiotics德國仹犇泰有限公司的資金支持。gbi中國飼料行業信息網-立足飼料,服務畜牧

      作者感謝克里斯·德貝克、王玉峰和郭曉泉幫助在農場對肉雞進行取樣,并感謝他們熟練的技術援助。作者的貢獻如下:A.K.進行了動物實驗,實驗室實驗,分析了數據,并在L.S.和N.E.的監督下撰寫了手稿的第一版;T. A. N.提出了研究問題,設計了研究,并為最終手稿的撰寫做出了貢獻。所有作者均聲明無利益沖突。gbi中國飼料行業信息網-立足飼料,服務畜牧

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